上海起發(fā)現(xiàn)貨PROGEN PRHYPE說(shuō)明書(shū)
在包裝常見(jiàn)的噬菌體展示噬菌粒時(shí)提供輔助噬菌體功能。通過(guò)pIII感染細(xì)菌。
貨號(hào): PRHYPE
數(shù)量: 5 x 2 mL(lyoph。)
€504.00
純度 | PEG沉淀 |
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包裝單位 | 5x2 mL(lyoph。) |
背景:
從富含超噬菌體的文庫(kù)中分離重組抗體,蛋白質(zhì)或多肽的有效工具。
輔助噬菌體技術(shù)(“Hyperphage系統(tǒng)”)由Rondot等人開(kāi)發(fā)。(Nature Biotechnology 19:75-81,2001)。Hyperphage系統(tǒng)允許通過(guò)增加每個(gè)噬菌體顆粒顯示的抗體數(shù)量(高達(dá)5對(duì)0.01)來(lái)改善噬菌體展示中的抗體呈遞,從而該系統(tǒng)在功能基因分析和蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域提供了巨大的優(yōu)勢(shì)??梢杂蒙倭靠乖透蔬M(jìn)行噬菌體的淘選。例如,通過(guò)在二維凝膠電泳后在蛋白質(zhì)斑點(diǎn)的印跡上平移超噬菌體包裝的文庫(kù),可以改善通用文庫(kù)用于抗體分離的應(yīng)用。
可以通過(guò)淘選合成的膜結(jié)合肽表位來(lái)分析大量的開(kāi)放閱讀框(ORF)。在癌癥研究中,超噬菌體包裝的文庫(kù)可以成為通過(guò)淘選細(xì)胞表面來(lái)發(fā)現(xiàn)新腫瘤標(biāo)志物的工具。
Hyperphages在pIII基因中攜帶缺失。它們由產(chǎn)生功能性pIII的大腸桿菌包裝細(xì)胞系產(chǎn)生,所述功能性pIII用于包裝具有pIII缺失的噬菌體基因組。產(chǎn)生的超噬菌體在其表面攜帶功能性pIII,但在其基因組中缺乏pIII基因。然后可以使用這些超噬菌體用噬菌粒文庫(kù)感染細(xì)菌。每個(gè)得到的展示噬菌體在其表面上攜帶幾個(gè)拷貝的抗體或肽,因此顯著提高了淘選效率。
通過(guò)使用hyperphage,抗原結(jié)合增強(qiáng)了兩個(gè)數(shù)量級(jí)。此外,由于攜帶抗體的質(zhì)粒(噬菌粒)編碼pIII和scFv片段之間的蛋白酶切割位點(diǎn),可以通過(guò)蛋白酶處理洗脫超噬菌體包裝的文庫(kù),允許洗脫高親和力的結(jié)合物,再加上恢復(fù)野生型感染性表型以優(yōu)化感興趣的抗體基因的恢復(fù)。
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