bioacademia 02-701說(shuō)明書
更新時(shí)間:2020-12-21 點(diǎn)擊次數(shù):1032
bioacademia 02-701說(shuō)明書
Product | cDNA Library S. cerevisiae Log Phase cDNA文庫(kù)釀酒酵母對(duì)數(shù)期 | |
Information | code:02-701 |
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該cDNA文庫(kù)(質(zhì)粒DNA)是由啤酒酵母S288C衍生的poly(A)+ RNA在對(duì)數(shù)期通過(guò)Linker-Primer方法(參考文獻(xiàn)1)由大阪H. Nojima教授構(gòu)建的。大學(xué)。通過(guò)使用寡核苷酸(dT)18接頭引物單向克隆該文庫(kù),該引物包含Not I和BamHI(Bgl II)-Sma I銜接子的限制性酶切位點(diǎn)。 該文庫(kù)中使用的pLZ3載體(如下所示)不能在啤酒酵母中復(fù)制,但包含pUCori以便在大腸桿菌中復(fù)制。
應(yīng)用 已知或未知基因的PCR篩選:準(zhǔn)備已知或未知基因(cDNA)的引物并擴(kuò)增通過(guò)從該文庫(kù)中PCR克隆該基因,然后克隆至合適的載體。 標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增條件:以10-100 ng cDNA為模板,進(jìn)行35個(gè)PCR反應(yīng)循環(huán)。(根據(jù)目標(biāo)基因的mRNA的表達(dá)率來(lái)改變模板的數(shù)量和循環(huán)數(shù)。)
規(guī)格 數(shù)量:在10 mM Tris-HCl-1mM EDTA(pH 7.5)中,500 ng(40 ng / ul 13ul) 質(zhì)量:1)獨(dú)立克隆的數(shù)量:3.6 x 106 2)平均插入片段大?。捍笥? kb 存儲(chǔ):-20℃
參考文獻(xiàn) 1. KoboriM。池田 奈良 加藤 久米川 野島 和川島 “通過(guò)改進(jìn)的方法大規(guī)模分離破骨細(xì)胞特異性基因,涉及制備減法cDNA文庫(kù)。” Genes Cells 3:459-475(1998)PMID:9753427 2.田中S。和野島 “ Nik1:釀酒酵母的Nim1樣蛋白激酶與Cdc28復(fù)合物相互作用并調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程。” Genes Cells 1 905-921(1996)PMID:9077450 3. SambrookJ。和RussellDW。分子克隆第11章“ cDNA文庫(kù)的制備和基因鑒定”。CSHL出版社(2001) | | 碼 | 數(shù)量 | 價(jià)錢 | | 02-701 | 500 ng | 330美元 | |
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