nanohelix 一步法 RT-PCR 試劑盒說(shuō)明書

一步法 RT-PCR 試劑盒 [ Speed-Pfu ]

HelixCript™ One-Step RT-PCR [ Speed-Pfu ] 設(shè)計(jì)用于在單管反應(yīng)中從總轉(zhuǎn)錄本中靈敏擴(kuò)增靶基因。HelixCript™ Thermo Reverse Transcriptase、Helixzyme™ RNase Inhibitor 和 HelixAmp™ Speed-Pfu聚合酶（高保真快速 PCR 酶）作為酶混合物提供。2x Reaction Mix 包含*的緩沖液、MgCl ₂和 dNTP。

圖 1. 使用 HelixCript™ 一步法 RT-PCR 試劑盒 [ Speed-Pfu ] 的快速 RT-PCR。一步 RT-PCR 反應(yīng)在修改后的方案下進(jìn)行如下：一步 RT-PCR 反應(yīng)所需的總時(shí)間為 1 小時(shí)。使用 HelixCript™ One-Step RT-PCR Kit [ Speed-Pfu ] 和用于人 β-珠蛋白的引物組，對(duì)1 至 100 ng 人血液總 RNA 進(jìn)行一步 RT-PCR。PCR反應(yīng)在95 ℃（10秒）、55 ℃（10秒）和72 ℃（20秒）進(jìn)行35個(gè)循環(huán)。

應(yīng)用

• 從 RNA 中檢測(cè)靶基因轉(zhuǎn)錄物

• 目標(biāo) cDNA 產(chǎn)物的克隆

• RNA轉(zhuǎn)錄水平的半定量、定量分析

內(nèi)容

• 酶混合物 [ Speed-Pfu ]，2x 反應(yīng)混合物 [ Speed-Pfu ]

質(zhì)量控制

使用 HelixCript™ 一步法 RT-PCR 試劑盒 [ Speed-Pfu ] 對(duì) cDNA 合成和靶基因轉(zhuǎn)錄物 PCR 擴(kuò)增的活性通過(guò) 10 倍連續(xù)稀釋的人總 RNA 的檢測(cè)限 (LOD) 測(cè)定進(jìn)行評(píng)估。